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响应面法优化普通小球藻低温短期保存条件
高金伟;张芮;姜青青;张丹;贾旭颖;窦勇;邵蓬;夏苏东;周文礼;为建立普通小球藻(Chlorella vulgaris)短期低温保存方法,优化低温保存条件,为水产经济动物提供优质生物饵料,试验以小球藻为受试藻株,甘油作为冷冻保护剂,藻细胞存活率为优化目标,作单因素试验筛选低温保存温度、藻细胞密度和时间共3个条件的最适范围,采用响应面法进一步优化短期低温保存条件并作验证试验。结果表明:通过单因素试验筛选出相对适宜小球藻短期低温保存温度、藻细胞密度和时间分别为-20~-196 ℃、2.5×105~5×105 cell/mL和12~144 h。响应面结果分析表明,对藻细胞存活率影响强弱依次为保存时间、保存温度和藻细胞密度;通过响应面法分析得到上述三个条件的最佳值为70.179 h、-78.91 ℃以及3.77×105 cell/mL;优化后的保存条件为藻细胞密度3.77×105 cell/mL,保存时间70 h,保存温度-80 ℃,小球藻复苏24 h细胞存活率70.11%。优化的条件为小球藻及其他淡水微藻细胞的低温保存提供了技术参考。
基于生长曲线分析琅琊鸡的保种效果
李国辉;侍佳敏;张会永;薛倩;周成浩;蒋一秀;殷建玫;韩威;为评价国家地方鸡种基因库保种群体的保种效果情况,采用三种非线性生长模型Logistic,Gompertz以及Bertalanffy对2019年和2022年2个世代的琅琊鸡保种群母鸡生长情况进行拟合,结果表明:2个世代体重拟合度(R2)都>0.996,根据R2值Gompertz模型对琅琊鸡生长拟合效果最佳,2个世代拟合的成熟体重为1967.965~1896.725g,拐点周龄为6.1~6.3周。结果符合琅琊鸡的保种和实际生产情况。综上,在地方鸡种保种过程中,可根据生长曲线特征对保种群体科学合理的进行饲养管理和监测保种效果,为地方鸡种资源的保护开发利用提供科学依据。
大鲵皮肤黏液糖蛋白对小鼠抗低氧能力的影响
安玉婷;李双;李安娜;李佳成;马博;李俊年;陶双伦;杨冬梅;糖蛋白是大鲵(Andrias davidianus)皮肤黏液的主要成份,具有抗氧化、抑菌等作用。以KM小鼠为研究对象,验证皮肤黏液糖蛋白的抗低氧作用,为后期探索大鲵对水中低氧环境的适应机制提供新的视角。以人参皂苷为阳性对照组,生理盐水为空白对照组,分别用600 mg/kg,800 mg/kg以及1 000 mg/kg剂量的大鲵皮肤黏液糖蛋白对小鼠进行连续7 d的腹腔注射,进行-常压密闭实验,并测定脑、肺组织含水量,以及血浆、脑组织和心肌组织中一氧化氮合酶(NOS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。大鲵皮肤黏液糖蛋白能够延长缺氧小鼠生存时间4.39% ~ 15.50%,降低小鼠脑含水量4.16%~13.12%,降低小鼠肺含水量6.90%~16.72%,并且能够显著增加缺氧小鼠血浆、脑组织和心肌组织中总NOS、GSH-Px、SOD活性,降低MDA水平(P<0.01)。大鲵皮肤黏液糖蛋白可提高小鼠的抗低氧能力,这可能是大鲵适应水中低氧环境的方式之一。
CRISPR-Cas系统的多样化类型、机制及其应用进展
卢泽宇;李蕴华;李媛;穆卿;吴子贤;张令天;王浩源;张燕军;苏蕊;王瑞军;刘佳森;赵艳红;过去,进化是由随机的基因突变和自然选择驱动的。现在,CRISPR (Clustered Regularly-Interspaced Short Palindromic Repeats)-Cas (CRISPR-associated proteins)可以自由改变生命方向,成为新型的基因编辑免疫系统分子工具。由于CRISPR-Cas系统精确、简单、高效、成本低并可与多种技术结合等优点,在基因功能研究、农牧业基因编辑育种、人类医学疾病治疗、药物研发和环境治理等领域都具有极大的应用前景。根据CRISPR序列结构特征和Cas蛋白的差异,在基因编辑领域主要存在2种类别6个类型的CRISPR,多种Cas蛋白及其辅助性蛋白,目前应用范围最广的基因编辑工具是CRISPR-Cas3、CRISPR-Cas9和CRISPR-Cas12系统。在这篇综述中,我们对CRISPR-Cas的不同类型、不同Cas蛋白的功能机制、现存问题以及应用挑战和前景进行讨论,阐明这一系统的多样性和复杂性,为未来几十年Cas蛋白在基因编辑、疾病防治等科学研究的使用提供理论参考。
不同来源马苏大麻哈鱼的生化指标研究
刘晓蕊;夏长革;刘新宇;吕沣铄;曲桂娟;李民;孔祎頔;王桂芹;为研究马苏大麻哈鱼(Oncorhynchus masou)资源保护策略和人工繁殖技术,以洄游型马苏大麻哈鱼、陆封型三倍体马苏大麻哈鱼、陆封型选育马苏大麻哈鱼和陆封型非选育马苏大麻哈鱼为研究对象,对它们的肝脏健康相关生化指标、糖脂代谢相关生化指标、消化酶活性和肾脏健康相关生化指标进行比较分析研究,深入了解该物种在不同生长环境和遗传背景下的生理适应性差异,为推动马苏大麻哈鱼的人工增殖放流工作,促进其种群资源的恢复和可持续利用提供基础数据。
植物乳杆菌胞外囊泡对DSS诱导结肠炎的缓解作用
单心;张仕涵;屈广隆;孙安琪;汤正旭;仉鑫悦;吴丹妮;刘紫璇;王一冰;胡静涛;为探究植物乳杆菌胞外囊泡对结肠炎的防治效果,本实验以从猪源植物乳杆菌LP中提取的胞外囊泡(LpEVs)作为研究对象,将其以不同浓度灌胃给C57BL/6小鼠后,再口服DSS诱导构建结肠炎模型。通过监测小鼠的体重变化率、疾病活动指数、结肠长度、脾脏指数,HE染色观察结肠组织病理变化,并通过ELISA检测血清中髓过氧化物酶的活性,IL-6、IL-1β和TNF-α细胞因子的表达。结果显示,DSS诱导的结肠炎小鼠体重下降,DAI指数升高,结肠缩短,脾脏指数升高,结肠组织损伤严重,血清髓过氧化物酶活性升高,促炎细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α表达水平升高,而在经过植物乳杆菌胞外囊泡干预后,上述结果均有所逆转,表明植物乳杆菌胞外囊泡对结肠炎具有较好的缓解作用,为揭示益生菌缓解结肠炎的机制提供理论基础。
IGF1R基因拷贝数变异与不同品种牛生长性状的关联
刘基伟;罗晓彤;李轩宇;刘洪亮;张聪聪;韩越;李春宇;李胜男;李瑞冬;赵玉民;吴健;拷贝数变异(CNV)是一种重要的遗传变异形式。胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)与骨骼发育和肌肉细胞增殖等相关,且IGF1R CNV与西北黄牛生长性能相关,然而其CNV与中国东北地区品种牛生长性状的研究尚未有相关报道。因此,本试验旨在研究IGF1R CNV与中国东北地区品种牛生长性状的相关性。采用qRT-PCR方法检测IGF1R CNV的分布及其mRNA的表达水平,并将CNV与生长性状进行关联分析。结果发现,IGF1R在各个品种牛中均存在不同类型的CNV,且IGF1R CNV与草原红牛(CYH)体重、体高、十字部高、体斜长、胸围、尻宽、腰脚宽、腹围和眼肌面积,延边牛(YB)背膘厚以及延黄牛(YH)体重、体高和十字部高显著相关。综上所述,IGF1R CNV与中国东北地区品种牛生长性状显著相关,可作为牛育种的分子标记。
辽宁圈养和野生东北林蛙肠道细菌多样性比较
张诗琪;贺晨;花语璐;苗子源;李振鑫;董丙君;为研究圈养环境与野生环境下的东北林蛙肠道细菌群落结构和功能的差异,于2023年4月-5月采集辽宁地区野生东北林蛙12只,圈养东北林蛙12只,分别取样十二指肠、小肠和大肠3个部位,合计72个样本,采用16 S rDNA高通量测序技术鉴定菌群结构,采用Alpha多样性分析、Beta多样性分析、Anosim分析和聚类分析方法比较两组间菌群差异,结果如下:(1)野生组林蛙肠道优势菌门为变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和放线菌门(Actinobacteria),优势菌属为不动杆菌属(Acinetobacter)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)和鞘氨醇杆菌属(Sphingobacterium);圈养组优势菌门为变形菌门、厚壁菌门和拟杆菌门(Bacteroidetes),优势菌属为黄金杆菌属(Chryseobacterium)、希瓦氏菌属(Shewanella)和黄杆菌属(Flavobacterium)。(2)在东北林蛙全肠道中,变形菌门、放线菌门和拟杆菌门均为相对丰度较高的菌门,相对丰度均为野生低于圈养。(3)野生和圈养组东北林蛙整体肠道细菌alpha多样性和beta多样性差异均显著;对野生和圈养东北林蛙的相同肠道部位之间的多样性进行比较,除小肠部位的alpha多样性和直肠部位的beta多样性差异显著外,其余均不显著。本研究结果为东北林蛙的保护工作和健康养殖提供科学依据。
吉林省梅花鹿布鲁氏菌病流行病学调查及分析
田贺实;王凯立;崔鹤馨;权心娇;李男;高启辰;任锐;郝良玉;田来明;为了解吉林省范围内梅花鹿布鲁氏菌病的流行情况,对调查对象进行了详细的问询,选取的对象均为规模化鹿场,鹿场为争取省级、国家级保种场和净化场,均未应用疫苗免疫。在此基础上对吉林省长春市、四平市、通化市、敦化市、辽源市、白山市6个地区的39个鹿场开展梅花鹿布鲁氏菌病的流行病学调查。采用两阶段抽样方法。结果表明,所涉及的6个地区布鲁氏菌病阳性率分别为长春市7.9%、四平市4.7%、通化市0%、辽源市7.9%、敦化市7.0%、白山市18.0%。对阳性率结果进行分析,提出科学有效的建议,为吉林省布鲁氏菌病防控及净化提供数据支持。
泌乳驴乳腺上皮细胞的体外分离培养与鉴定
张淑贤;许涛;刘新宇;颜琼娴;刘利林;卢冬;于治成;周小玲;本试验旨在探究驴乳腺上皮原代细胞的培养方法,为驴乳腺上皮细胞泌乳相关机制的研究提供试验材料。步骤包括采集泌乳期驴乳腺组织,分离上皮细胞、纯化和鉴定。结果发现:通过组织块培养法和胶原酶Ⅱ消化法分离的乳腺上皮细胞形态呈“多边形”或“铺路石形,且生长状况良好,免疫荧光鉴定结果呈阳性。综上,通过本试验方法,能够成功分离得到纯化的驴乳腺上皮细胞,为后续的试验提供试验材料。