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牛磺脱氧胆酸对泥鳅生长性能、免疫功能与胆汁酸代谢的影响
张欣羽;孙丽;郭贵良;夏长革;方琼亚;李民;王桂芹;孔祎頔;为研究饲料中牛磺脱氧胆酸（Taurousodeoxycholic acid，TUDCA）对泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus）生长性能、免疫功能、肝胰脏健康及胆汁酸代谢的影响。本试验在基础饲料中分别添加0、100、200、300和400 mg/kg的TUDCA，即对照（CON）组、TU100、TU200、TU300和TU400组，进行为期56 d的饲养试验，测量生长性能指标并对免疫功能指标、免疫功能相关基因及胆汁酸代谢相关基因的表达进行检测。结果显示，与CON组相比，各试验组终末体质量均显著提升（P<0.05），TU200、TU300与TU400组泥鳅增重率（WG）和特定生长率（SGR）均显著升高（P<0.05）；TU300组蛋白质效率比（PER）和饲料转化率（FCR）得到显著提升（P<0.05）；TU200、TU300和TU400组泥鳅血清中补体3（C3）、补体4（C4）与免疫球蛋白M（IgM）含量显著升高（P<0.05），TU200和TU300组溶菌酶（LYS）活性显著升高（P<0.05）；TU200、TU300和TU400组泥鳅肝胰腺中AST、ALT与ALP含量显著下降（P<0.05）；TU200、TU300和TU400组泥鳅肝胰腺中il-10与tgf-β的mRNA表达量显著上升（P<0.05）且il-1β与il-12的mRNA表达量显著下降（P<0.05），TU300和TU400组il-8与tnf-α的mRNA表达量显著下降（P<0.05）；TU200、TU300和TU400组泥鳅肝胰腺中fxr、bsep与shp的mRNA表达量显著升高（P<0.05），cyp7a1、cyp27a1与cyp8b1的mRNA表达量显著下降（P<0.05）。综上所述，在饲料中添加适宜TUDCA能够提高泥鳅生长性能、增强免疫功能、保护肝胰腺健康并调节胆汁酸代谢，在本试验条件下，经回归分析得出，当增重率最大时，泥鳅饲料中TUDCA的最适添加量为327.4 mg/kg。
梅花鹿FHL3基因克隆、生物信息学分析及组织表达
朱涛;李和平;马瑜锴;邢海华;刘伟石;四个半LIM域蛋白3（FHL3）可以通过LIM结构域与多种蛋白质相互作用，从而调控成肌细胞分化与肌细胞的形成。本试验以雌、雄梅花鹿（Cervus nippon）背最长肌、股四头肌、颈斜方肌、肱二头肌、臀大肌为样品，成功克隆出FHL3基因CDS区，长度为843bp，编码280个氨基酸；Blastp结果显示梅花鹿FHL3基因序列与马鹿相似性最高，与小鼠亲缘关系较远；生物信息学预测显示FHL3蛋白为亲水蛋白，定位于细胞核内，二级结构主要由无规则卷曲、α-螺旋和β-折叠构成；荧光定量PCR结果显示FHL3基因在肱二头肌中相对表达量最高，雌、雄间仅颈斜方肌与臀大肌存在差异表达。本试验旨在深入了解梅花鹿FHL3基因基本信息，为进一步揭示FHL3基因调控梅花鹿骨骼肌纤维类型分化机制研究奠定基础。
基于非靶向代谢组学分析洄游型与陆封型马苏大麻哈鱼肌肉代谢差异
焦思琦;陈春山;李欣;曲桂娟;李民;孔祎頔;王桂芹;本研究采用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)非靶向代谢组学技术，结合多元统计分析，系统比较了洄游型与陆封型马苏大麻哈鱼(Oncorhynchus masou)肌肉代谢物的组成差异。共鉴定出13类1958种代谢物，筛选出392种显著差异代谢物(VIP＞1，P＜0.05)，其中脂类及类脂分子占比最高(33.9%)，其次为有机酸及其衍生物(8.4%)。KEGG通路富集分析表明，洄游型个体的差异代谢物显著富集于氧化磷酸化、产热作用、氨基酸生物合成及脂肪酸代谢等通路，提示其通过增强脂质动员、氨基酸周转及能量生成效率适应高能耗的洄游行为；而陆封型个体则更多涉及嘌呤代谢及基础代谢途径，与其稳定的淡水环境及较低的能量需求相适应。本研究揭示了两种生态型在代谢水平上的显著分化，为理解马苏大麻哈鱼生态型进化的代谢调控机制提供了新见解，同时为其资源保护与可持续利用提供了理论依据。
水飞蓟素对黄颡鱼生长性能、体组成及非特异性免疫指标的影响
尹思玲;卢璐;周芷多;宋健;邵云龙;孔祎頔;陈秀梅;李民;牛小天;王桂芹;为探究水飞蓟素对黄颡鱼的生长性能、体组成及非特异性免疫指标的影响，试验配制5种等氮(43.96%)、等能(17.94 kJ/kg)且不同水飞蓟素水平(0、50、100、150和200 mg/kg)的配合饲料，每种饲料设置3个重复，每个重复饲喂黄颡鱼30尾，暂养2周后，进行为期8周的饲养试验。结果显示：S3组的FBW、WGR、SGR和PER与S4组无显著性差异(P<0.05)，但均显著高于S1组、S2组和S5组(P<0.05)；S3组与S4的FCR无显著性差异(P<0.05)，但均显著低于S1组、S2组和S5组(P<0.05)；各试验组的SR均显著高于对照组S1组(P<0.05)。各组分的粗蛋白含量无显著性差异(P>0.05)；S3组的粗脂肪和水分含量与S4组和S5组无显著性差异(P>0.05)，但显著低于对照组S1组(P>0.05)；S3组的粗灰分含量显著高于S2组和S1组(P<0.05)，显著低于S4组和S5组(P<0.05)。水飞蓟素对各组的AKP活性无显著性影响(P>0.05)；S3组的SOD、LZM和ACP活性与S4组无显著性差异(P>0.05)，但显著高于S1组、S2组和S5组(P<0.05)。在本试验条件下，饲料中添加水飞蓟素能够提高鱼体的生长性能，降低鱼体粗脂肪含量，提高鱼体非特异性免疫力，且最适添加量为100mg/kg时效果最佳。
新城疫病毒强毒株微型基因组双质粒拯救系统的构建
朱广美;宗宪春;徐哲;王丹;肖萌萌;王建忠;为建立新城疫病毒（NDV）强毒株NA-1微型基因组（minigenome，MG）双质粒高效拯救系统，本研究将NDV NA-1株基因组3'-Leader、5'-Tailer序列以及增强型绿色荧光蛋白（Enhanced Green Fluorescent Protein ，EGFP）基因序列，反向克隆至T7启动子调控的表达质粒pcDNA3.1，同时在微型基因组表达质粒3'端引入丁肝核酶和T7终止子序列，构建成NDV NA-1株微型基因组转录质粒pcDNA3.1-NDV-MG。将分别表达NP、P和L的三个辅助质粒优化为能够同时表达NP、P和L蛋白的多启动子单质粒pcDNA3.1-NPL，并与pcDNA3.1-NDV-MG组成双质粒拯救系统共转染表达T7 RNA聚合酶的BSR细胞，通过荧光显微镜观察EGFP报告基因的表达鉴定拯救是否成功。结果显示，共转染48 h后，BSR细胞内可观察到特异绿色荧光信号，表明NDV强毒株微型基因组双质粒拯救系统构建成功，并且与传统四质粒系统相比，所构建的双质粒系统表现出更高的拯救效率。本研究成功构建了高效的NDV微型基因组双质粒拯救系统，不仅为NDV高效反向遗传操作平台的建立奠定了基础，也为后续致病机制研究、新型疫苗研制及病毒活载体开发提供了强有效的工具。
猪流行性腹泻病毒兔多克隆抗体的制备与鉴定
方树人;蔡佳希;李子树;王毓;方晓寒;曹欣;薛向红;为了探究兔多克隆抗体在猪流行性腹泻病毒检测和鉴定中的有效性。本研究通过Vero细胞大量培养了猪流行性腹泻病毒(PEDV)，并利用蔗糖密度梯度离心法对其进行了浓缩纯化。以纯化后的PEDV免疫新西兰白兔四次，采集收获了大量PEDV兔血清，用饱和硫酸铵沉淀法对其进行粗提，再用亲和层析法纯化得到PEDV兔多抗。ELISA检测结果显示，PEDV兔多抗的ELISA效价为1∶32000。间接免疫荧光试验结果表明，PEDV兔多抗能够识别PEDV-XD(G2a型)株、PEDV G1型CV777株，但不与猪其他易感病原猪瘟病毒C株(CSFV-C)、猪伪狂犬病毒K61株(PRVbartha-K61)发生反应，这提示，本研究制备的PEDV兔多抗具有检测的广谱性和特异性。Western blot鉴定结果显示，PEDV兔多抗能够与PEDV G2a和G1型的核衣壳蛋白N、刺突蛋白S、膜蛋白M发生特异性识别，其中，对N蛋白识别信号最强。此外，PEDV兔多抗具有体外中和活性，对PEDV-XD(G2a型)株的中和IC50为1.418μg/mL，对G1型CV777株的中和IC50为5.524 μg/mL，这表明PEDV兔多抗具有治疗潜力。综上，本研究为PEDV检测和鉴定提供了经济高效的多抗试剂，为PEDV治疗性抗体开发奠定了基础。
十足目虹彩病毒1对罗氏沼虾肠道菌群的影响
江浩;陈静;姚嘉赟;郑阿钦;袁雪梅;黄雷;彭先启;步夏莲;张海琪;为研究十足目虹彩病毒1（DIV1）对罗氏沼虾肠道菌群的影响，对罗氏沼虾进行人工感染实验，采集攻毒前后罗氏沼虾肠道、肝胰腺、鳃及肌肉组织，并利用qPCR技术检测罗氏沼虾肝胰腺、鳃及肌肉组织中的DIV1病毒载量，利用16S rRNA高通量测序对比研究健康罗氏沼虾和发病罗氏沼虾肠道菌群的组成及多样性。结果表明，罗氏沼虾感染DIV1后的72 h内其肝胰腺、鳃及肌肉组织中的病毒迅速增殖，并且DIV1感染会导致罗氏沼虾肠道菌群发生变化，感染DIV1后肠道内其他条件致病菌的丰度较对照组显著上升。健康罗氏沼虾肠道中的优势类群为厚壁菌门，其次为变形菌门，优势菌属为乳球菌属。而发病罗氏沼虾肠道中的优势类群则为变形菌门，其次为拟杆菌门和厚壁菌门，优势菌属为金黄杆菌属。研究结果有助于了解十足目虹彩病毒1对罗氏沼虾肠道细菌群落的影响，并为罗氏沼虾的健康管理和养殖提供依据。
鹿血生物活性肽的分离纯化及抑制大肠杆菌的功能
刘东跃;都坤;李一;房嘉园;张丽波;张洵铭;王祎玮;马泽;张一宁;王军;抗菌肽是自然界中广泛存在的一类小肽，具有抑制细菌生长的能力。以往研究表明鹿血中的生物活性成分具有抗菌作用。为探究鹿血生物活性肽的抗菌组分分布及应用前景，本实验以鹿血冻干粉为原料，以抑菌实验为筛选指标，首先通过单因素优化筛选最佳酶解条件，随后对鹿血酶解产物进行分级超滤并测定分子量分布，后续确定多肽的最低抑菌浓度并建立时间杀菌曲线，最后利用CCK-8测定细胞毒性并对多肽的氨基酸组成进行鉴定。实验结果显示，酶活为2000 u/g的木瓜蛋白酶为最佳蛋白酶，酶解时长为5 h，pH = 6。鹿血生物活性肽的相对分子量分布主要集中在3 kDa以下（97.10%），无细胞毒性且其中含有较高水平的疏水氨基酸（44.20%）和碱性氨基酸（21.4%）。本研究结果表明，鹿血生物活性肽具有一定的体外抗菌能力。
鹿茸治疗关节炎的研究进展
张俣;颜辛芮;李鑫;韩欣桐;刘畅;刘威;李雅鑫;贾博寅;关节炎是一种软骨细胞或基质受损、丢失的退行性骨关节病，由于软骨中缺少血管难以自愈，寻找治疗关节炎的方法至关重要。鹿茸在快速生长期，每天可生长2 cm，主要由干细胞及其分化的软骨构成，并且含有大量的血管。最新研究发现鹿茸对治疗骨关节炎，修复软骨缺损，抑制炎症等方面有明显效果，基于此，本文综述了关节炎的发生机理与治疗方法的不足之处，提出了鹿茸是修复软骨损伤的理想模型，深入探讨了鹿茸及其衍生物对关节炎的修复作用，强调了它们在软骨修复和炎症抑制方面的双重功效，为未来鹿茸及其衍生品在关节炎治疗中的应用奠定基础。
鹦鹉热衣原体MOMP蛋白的真核表达及iELISA方法的建立
刘世博;王楠;任小侠;梅浩;段跃强;蔡亚南;为建立一种具有良好特异性和敏感性的鹦鹉热衣原体iELISA检测方法。根据Cps ompA基因序列构建重组质粒PfastBac1-dx，利用bac to bac杆状病毒表达系统表达目的蛋白并用His镍柱进行纯化，经Western blot鉴定后，将纯化的MOMP蛋白作为检测抗原进行包被，成功建立了一种iELISA方法。通过对包被条件、封闭液种类、封闭时间及血清孵育时间等关键反应条件进行系统优化，进一步对该方法的临界值、特异性及灵敏性进行了全面验证。Western blot分析结果表明，MOMP蛋白能够与Cps阳性血清发生特异性结合反应。优化后的ELISA反应条件为：10μg/mL抗原4℃包被12 h，1%明胶4℃封闭12 h，1∶50稀释的血清37℃孵育2 h，1∶0.1μg/mL的G蛋白二抗37℃孵育2 h。该方法灵敏性较高，Cps阳性血清稀释度为1∶800时仍有明显反应。与IHA试剂盒相比，其总符合率为85.07%。本研究建立了一种以Cps MOMP蛋白为检测抗原的可同时检测牛和羊的CpsiELISA方法，该方法具有良好的敏感性和特异性，能运用于Cps的血清学检测，为鹦鹉热衣原体疫苗的质量控制提供技术支撑。