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黑龙江省某猪场PRRSV分子特性分析
赵昱凯;周可鑫;仲宇思;王雅;于淑媛;杨桂连;为了解黑龙江省某规模化养猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的遗传变异特性,本研究在2021-2024年间在该猪场共采集354份样品,通过实时荧光定量PCR检测样本,结果显示有38份样本为阳性,总阳性率为10.73%,2021年至2024年阳性率无明显递增或递减趋势。分别对获得的38份阳性毒株序列进行遗传进化、同源性和编码氨基酸的变异特性分析。基于ORF5的遗传进化分析结果显示,共筛选获得3株亚谱系1.8、25株亚谱系1.5以及10株谱系8。同源性分析证明38株PRRSV毒株核苷酸序列相似性为82.7%-100%,氨基酸序列相似性为81.7%-99.5%。氨基酸突变分析表明,GP5蛋白的信号肽、中和表位、T细胞表位和B细胞表位均发生氨基酸突变,其中10株PRRSV同时保留R13和R151毒力位点。本研究通过对2021-2024年间黑龙江省某猪场PRRSV流行情况的长期监测,并对阳性样本进行分子特征分析,综合阐明该猪场PRRSV流行特点及遗传多样性,为PRRSV的流行病学状况及疫情预防和控制提供理论基础。
黏膜修复型干酪乳杆菌Lc-ST6-LFCA-TFF3的构建及特性研究
邵鑫;张璇;单裕荃;曹倍源;王博杨;张冬星;沙门氏菌是一类常见的肠道致病菌,广泛存在于自然界中,尤其是动物体内,是食品安全和公共卫生领域中的重要病原。鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella enterica serovar Typhimurium)是沙门氏菌的一个典型亚种,能够感染多种动物,包括小鼠和人类。抗生素治疗虽然可以有效抑制细菌生长并缓解症状,但使用不当会导致耐药性问题甚至造成肠道微生态失衡,必须谨慎使用并探索替代治疗方法,如益生菌治疗。鉴于此,本研究以干酪乳杆菌(Lactobacillus casei ATCC393)为宿主益生菌,将ST6GALNAC1、LFCA和TFF3基因融合,定向克隆至pPG-612载体,经电转化得到新功能型干酪乳杆菌Lc-pPG-ST6-LFCA-TFF3(Lc-pPG-SLT)。通过细胞安全性实验鉴定工程菌对肠上皮细胞LS174T的安全性,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测,发现工程菌能显著上调紧密连接蛋白Occludin和Claudin-1的表达,其自身并未诱导渗漏型孔道蛋白Claudin-2的异常升高,同时能够抑制炎症因子的表达。该菌株的构建为开发靶向肠道屏障修复的基因工程益生菌提供了实验依据和新思路。
反刍动物青贮饲料开发及应用进展
周鑫彤;张学峰;甄玉国;青贮饲料是一种经厌氧乳酸菌发酵的高水分饲料,其具有营养价值高、适口性好、便于储存和运输的优点。在反刍动物生产中,青贮饲料可提高动物的采食量及饲料转化效率,使养殖者获得更高的生产效益。因此,本文总结了青贮饲料的类型、青贮饲料营养价值的评价手段及青贮在动物生产中的应用,望能够为未来青贮饲料的开发及应用提供相应的理论指导。
猫源EGFR基因绝对荧光定量检测方法的建立及其组织表达分析
阿依提肯·帕热哈提;潘英;汤傲星;李传峰;孟春春;刘光清;韩春杨;朱杰;表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)是介导细胞增殖、分化与修复的关键受体,其异常表达与多种肿瘤定量方法,以猫EGFR重组质粒为标准品构建标准曲线,用于猫源EGFR拷贝数测定,并在此基础上对猫与鼠多组织EGFR mRNA丰度进行比较。结果显示:引物扩增特异性良好,标准曲线相关系数R2=0.996,扩增效率约99.7%,定量线性范围为发生发展密切相关。为获得伴侣动物正常组织中EGFR的定量基线,本研究建立了基于SYBR Green I的实时荧光定量PCR(qPCR)绝对5.2×108–5.2×101 copies/μL,最低检测限约为5.2×101 copies。对重复孔中偏离均值较大的数据点剔除后,健康猫13种组织中EGFR含量为1.64×102–2.02×103 copies/μg total RNA,其中小肠最高(2024.178),其次为结膜(778.595)和心脏(724.542),脾脏最低(164.276)。健康鼠12种组织中EGFR含量为1.97×102–2.38×103 copies/μg total RNA,以肾脏最高(2382.941),肝脏(922.530)与脾脏(858.902)次之。跨物种比较显示,小肠与结膜在猫中高于鼠(分别约6.67倍与3.32倍),而肾脏与肝脏在鼠中更高(分别约5.70倍与2.59倍)。综上,本研究建立的猫源EGFR绝对定量qPCR方法可获得跨组织可比的拷贝数结果,并为猫与鼠正常组织EGFR表达分布提供了定量基线,可为比较研究、疾病标志物筛选及靶向药物安全性评估提供参考。
微生态制剂在动物肠道疾病防治中的应用研究进展
丁宁;杨树宝;马馨;肠道疾病是制约畜禽、水产及伴侣动物健康养殖的关键因素。抗生素的长期滥用已引发严重的耐药性、药物残留及生态失衡问题,亟需绿色安全的替代策略。微生态制剂(包括益生菌、益生元及合生元)通过调节肠道微生态平衡、增强肠道屏障功能、调节免疫应答及竞争性抑制病原菌等机制,在预防和治疗多种动物肠道疾病中展现出巨大潜力。本文系统综述了微生态制剂对肠道疾病防治的作用机制,重点阐述了其在禽类、猪、犬猫、水产动物、毛皮动物及反刍动物等不同种属动物肠道疾病防治中的研究进展与应用效果,以期为微生态制剂在畜牧生产中的科学应用提供理论参考和实践指导。
微生态制剂在特种经济动物生产中的应用
李思齐;刘伟石;孔石;张圆圆;随着畜牧业绿色化和禁抗政策的实施,微生态制剂因其安全、环保、无残留等优势,成为替代抗生素、促进动物健康养殖的重要方向。本文综述了微生态制剂的作用机制及其在特种经济动物中的应用研究进展,重点阐释了微生态制剂对特种经济动物肠道微生态平衡及免疫代谢的调控作用,其在抵抗病原微生物入侵、促进营养物质消化吸收,以及提高生产性能和机体免疫力方面,起到关键的靶向调控作用。由此,本文旨在为减少抗生素使用、提高特种经济动物的养殖效益提供理论参考。
山东省PRRSV的ORF5基因遗传进化分析
王雅;仲宇思;周可鑫;赵昱凯;于淑媛;杨桂连;猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是严重威胁养猪业的重要病原之一。为探究山东省PRRSV的遗传进化特征,本研究于2022-2023年间在山东省18个养殖场采集79份PRRSV阳性样本,对ORF5基因进行扩增与测序,并开展系统发育分析、核苷酸及推导氨基酸同源性、氨基酸变异特征及GP5 N-糖基化位点分析。系统发育分析结果显示,79株ORF5基因序列均属于PRRSV-2,主要分布于亚谱系1.8、亚谱系1.5和谱系8。山东省以亚谱系1.8为优势谱系(44/79),其占比由2022年的43.75%上升至2023年的63.83%。同源性分析表明,谱系8、亚谱系1.5和1.8的毒株间核苷酸和推导氨基酸相似性分别为97.7%-100%/96.0%-99.5%、91.7%-100%/89.6%-99.5%和84.6%-100%/81.1%-99.5%,而谱系8与谱系1间核苷酸和推导氨基酸相似性降低至80.4%-86.9%/78.6%-89.1%。氨基酸突变分析显示,GP5蛋白的信号肽、中和表位、T细胞表位和B细胞表位均存在氨基酸突变,其中10株病毒同时保留R13和R151毒力相关位点。N-糖基化位点分析共鉴定出2-5个潜在位点,其中N44和N51位点的糖基化修饰在各谱系中相对保守,不同谱系呈现特异的N-糖基化特征:谱系8在N35位、亚谱系1.5在N57位、亚谱系1.8在N50位,均为各谱系所特有。综上,山东省PRRSV流行呈现以亚谱系1.8为主导、多谱系共存的特征,ORF5基因推导氨基酸位点及N-糖基化位点存在不同程度的变异。本研究丰富了山东省PRRSV的分子流行病学数据,为该病的防控提供了理论参考。
植物乳杆菌LPJZ-658对新生吉林花猪仔猪生长性能及肠道菌群的影响
陈作鹏;张加力;为明确植物乳杆菌LactiplantibacillusplantarumLPJZ-658对新生吉林花猪仔猪生长性能及肠道菌群的调控作用,选取体重相近的哺乳仔猪18头,随机分成Control组和LP组,连续灌胃63d。LP组每日灌胃1.0×1010CFU/dLPJZ-658,Control组灌胃等量生理盐水。结果显示,与Control组相比,LP组仔猪在28d和63d体重及平均日增重显著提高,料重比显著降低(P<0.05)。16SrRNA测序结果表明,两组α多样性无显著差异,但β多样性显著分离;LP组拟杆菌门相对丰度升高,厚壁菌门降低。功能预测分析显示,LPJZ-658干预可能影响肠道菌群代谢相关通路,并降低感染性疾病相关功能的预测丰度。综上,新生阶段持续干预LPJZ-658 可促进地方种猪早期生长,并重塑肠道菌群结构与潜在功能,为地方猪早期营养调控提供理论依据。
马乳、驴乳和骆驼乳中常规营养成分含量的比较研究
木颖琦;米丽娟;冯玉龙;曲洪磊;李作伟;康瑞芬;马秋刚;逄金柱;黄世猛;本试验旨在比较驴乳、骆驼乳和马乳的营养成分组成及含量差异,解析不同特色乳的营养特征,为特色乳的科学开发与利用提供参考依据。采用特定方法检测驴乳、骆驼乳和马乳中常规营养成分,包括水分、非脂乳固体、灰分、乳蛋白、乳脂、乳糖、钙和维生素D含量,并比较不同乳之间的营养成分差异。结果表明,不同物种乳的营养成分存在明显差异。驴乳水分含量显著高于马乳和骆驼乳(P<0.05),马乳显著高于骆驼乳(P<0.05);马乳非脂乳固体含量显著高于驴乳(P<0.05),骆驼乳处于两者之间,与驴乳和马乳差异均不显著。骆驼乳灰分、乳蛋白和乳脂含量均显著高于驴乳和马乳(P<0.05),其中马乳乳脂含量显著高于驴乳(P<0.05),而驴乳与马乳乳蛋白含量差异不显著。乳糖含量方面,马乳显著高于骆驼乳(P<0.05),驴乳与马乳及骆驼乳差异均不显著。矿物质方面,驴乳钙含量显著高于骆驼乳和马乳(P<0.05),而骆驼乳与马乳差异不显著。维生素D含量表现为驴乳最高,其次为骆驼乳,马乳最低,三者之间差异均显著(P<0.05)。总体来看,骆驼乳富含灰分、乳蛋白和乳脂,驴乳具有较高的水分、钙和维生素D水平,马乳则表现出较高的非脂乳固体和乳糖含量。研究结果揭示了三种特色乳在营养组成上的差异,可为其营养评价与开发利用提供理论依据。
病毒感染诱导线粒体损伤机制研究进展
赵祎星;周泓名;王丽华;刁乃超;线粒体是真核细胞重要的细胞器,其主要功能包括能量代谢、氧化应激、天然免疫信号转导等,因此维持其功能稳态对细胞存活至关重要。大量研究表明,病毒会通过编码特异性蛋白、劫持或干扰宿主通路等方式靶向干扰线粒体功能,进而影响病毒复制与宿主病理进程。本文围绕病毒感染过程中出现的线粒体损伤类型,包括线粒体膜电位下降、活性氧累积异常、质量控制体系紊乱及能量代谢重编程等表型变化,并重点剖析不同病毒在调控线粒体损伤过程中的共性特征与个体差异。本综述为深入理解病毒致病机制提供理论参考,也为靶向线粒体抗病毒药物研发与临床应用奠定基础。